JD足球反波胆APP下载在常温常压下为无色无味气体，其分子量小，在体内可无障碍地透过各种屏障进入细胞内部。2007年，有学者发现吸入低浓度的JD足球反波胆APP下载在体内可中和毒性自由基，减少缺血再灌注损伤。之后，JD足球反波胆APP下载的生物医学效应得到了广泛关注。从基础研究到临床治疗，JD足球反波胆APP下载在呼吸系统疾病、代谢性疾病、衰老相关疾病等多个领域崭露头角。JD足球反波胆APP下载用于人体的安全性体现在多个方面：首先，JD足球反波胆APP下载是人体肠道菌群的正常代谢产物。同时，在潜水医学领域JD足球反波胆APP下载早已应用于人体，没有发现任何的毒性反应及不良后果。在JD足球反波胆APP下载医学迅速发展的近十几年中，大量的临床试验也未发现JD足球反波胆APP下载的毒副作用。更多高质量的JD足球反波胆APP下载安全性和有效性数据有待科学家们进一步收集分析。在我国，JD足球反波胆APP下载已被认可作为食品添加剂，出现在正式颁布的国家标准中，在日本、欧盟、美国，JD足球反波胆APP下载也被列为安全的食品添加剂。作用于人体的JD足球反波胆APP下载供体多种多样，主要包括吸入不同浓度JD足球反波胆APP下载、饮用富氢水、氢水沐浴等，其中饮用富氢水是较为常见的一种方式。


富氢水即含有JD足球反波胆APP下载的水，其制备及储存方式有多种，JD足球反波胆APP下载含量为评价富氢水的最关键指标之一。在常温常压下饱和JD足球反波胆APP下载水溶液中JD足球反波胆APP下载含量约为1.61 mg/L，通过微气泡等技术，可以使水中不仅有溶解状态的JD足球反波胆APP下载，也有微气泡状态的JD足球反波胆APP下载，从而提高了富氢水中的JD足球反波胆APP下载含量。目前水中JD足球反波胆APP下载含量的检测方法有气相色谱法、JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载法、亚甲蓝JD足球反波胆APP下载化还原滴定法等。文献中已有相关检测方法的报道，但检测对象均为实验室中充入JD足球反波胆APP下载的水，对市面上的富氢水产品或超饱和富氢水中JD足球反波胆APP下载含量检测尚无报道。这些方法是否适合目前富氢水产品中JD足球反波胆APP下载含量的检测尚无系统研究。气相色谱法检测从富氢水中释放出来的JD足球反波胆APP下载，对于含微气泡的超饱和富氢水，可以通过加热等方式促进JD足球反波胆APP下载的释放。氢电极法适用于检测溶解于水中的JD足球反波胆APP下载，其测量范围为饱和浓度以下，目前市面上很多富氢水为超饱和的微气泡富氢水，本文通过稀释的方式使JD足球反波胆APP下载浓度至饱和以下并完全溶解。亚甲蓝JD足球反波胆APP下载化还原滴定法通过纳米铂催化JD足球反波胆APP下载还原亚甲蓝，根据亚甲基蓝的用量得到水溶液中JD足球反波胆APP下载的含量。此法方便快捷，但较为粗略，无法准确定量。


在我国，富氢水产品尚未制订国家标准和行业标准，目前仅有团体标准T/NAHIEM 16-2019《含氢包装饮用水》，其中提到“产品保质期内，JD足球反波胆APP下载含量不低于0.6 mg/L”，在JD足球反波胆APP下载含量检验中提到“JD足球反波胆APP下载的含量使用气相色谱法进行测定（对氢浓度的检测也可采用与气相色谱法精度相当的检测方法）”，但具体检测流程尚未制定。为规范相关市场，推进行业发展，建立标准的富氢水中JD足球反波胆APP下载含量检测方法刻不容缓。可以定量检测富氢水中JD足球反波胆APP下载含量的方法主要为顶空-气相色谱法和JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载法。本文对两种检测方法进行了方法学验证，建立了可用于实际富氢水产品中JD足球反波胆APP下载含量的检测方法，并检测了市面罐装富氢水中JD足球反波胆APP下载含量，可以为相关应用提供参考。


1材料与方法


1.1材料与仪器


20 mL顶空瓶美国Agilent公司；超纯水密理博Milli-Q超纯水机；7种市售罐装富氢水（产品1，生产日期：2022-02-25，1.5 mg/L＜标注浓度＜2 mg/L；产品2，生产日期：2022-02-26，2.5 mg/L＜标注浓度≤3 mg/L；产品3，生产日期：2022-01-25，1.5 mg/L＜标注浓度＜2 mg/L；产品4，生产日期：2021-11-24，2.5 mg/L＜标注浓度≤3 mg/L；产品5，生产日期：2021-11-23，2 mg/L≤标注浓度≤2.5 mg/L；产品6，生产日期：2022-01-19，2 mg/L≤标注浓度≤2.5 mg/L；产品7，生产日期：2022-01-19，1.5 mg/L＜标注浓度＜2 mg/L）。


8890气相色谱仪配热导检测器、7697A顶空进样器、GS-CarbonPLOT毛细管柱（30 m×3μm，0.32 mm）美国Agilent公司；JD足球反波胆APP下载系统（配有H2-50JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载）丹麦JD足球反波胆APP下载公司；SPE-300纯水JD足球反波胆APP下载发生器济南浩伟实验仪器有限公司。


1.2实验方法


1.2.1JD足球反波胆APP下载标准水溶液的制备

在20℃，标准大气压（101 kPa）下将JD足球反波胆APP下载发生器制备的高纯度JD足球反波胆APP下载（＞99.99%）经分散器充入超纯水中直到饱和。查阅文献可知此时水中JD足球反波胆APP下载浓度约为805μmol/L，即1.61 mg/L。将此溶液用超纯水稀释，配制成浓度为0、0.161、0.322、0.805、0.966、1.449、1.610 mg/L的标准工作溶液。


1.2.2顶空-气相色谱检测

色谱柱：GS-Carbon-PLOT毛细管柱（30 m×3μm，0.32 mm）；载气（N2）流速3.0 mL/min；进样口温度200℃，分流比20:1；柱温35℃，检测器温度:200℃。顶空条件：样品平衡时间20 min；顶空瓶温度70℃；定量环温度80℃；传输线温度80℃；进样时间0.5 min。取5 mL标准工作液置于20 mL顶空瓶中，立即封闭后检测，得到标准曲线。将待测富氢水用超纯水稀释至标准曲线范围内（JD足球反波胆APP下载浓度＜1.61 mg/L），取5 mL稀释后样本置于20 mL顶空瓶中检测。根据标准曲线计算稀释后样本中JD足球反波胆APP下载含量，并乘以稀释倍数得到原始样本中JD足球反波胆APP下载含量。


1.2.3JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载检测

JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载极化电压为100 mV，将JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载插入超纯水中，待电极信号稳定后开始进行检测。极化时间约为2 h。取10 mL标准工作液于50 mL离心管中，立即将JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载插入液面以下待信号稳定，得到标准曲线。将待测富氢水用超纯水稀释至标准曲线范围内（JD足球反波胆APP下载浓度＜1.61 mg/L），取10 mL稀释后样本检测，根据标准曲线计算稀释后样本中JD足球反波胆APP下载含量，并乘以稀释倍数得到原始样本中JD足球反波胆APP下载含量。


1.2.4罐装富氢水产品中JD足球反波胆APP下载含量检测

开盖后立即取适量体积富氢水用超纯水稀释至标准曲线范围内（JD足球反波胆APP下载浓度＜1.61 mg/L），根据1.2.2和1.2.3中的方法分别检测罐装富氢水产品中JD足球反波胆APP下载含量。检测日期均为2022年3月，各产品均在保质期内。对于产品1和产品2，采用JD足球反波胆APP下载JD足球反波胆APP下载法检测开盖后8.3 h内定时取样，检测JD足球反波胆APP下载含量随时间变化情况。


1.3数据处理


相关实验重复3次，数据用均值±标准差表示。2组之间检测结果使用独立样本t检验分析显著性差异。采用使用SPSS 20及Origin 8.5软件进行数据分析及图形绘制。